【琼脂糖凝胶电泳】琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分子生物学技术，主要用于分离和分析DNA或RNA片段。该方法基于带电粒子在电场中的迁移速率与其大小、形状及所带电荷之间的关系。琼脂糖凝胶因其良好的透明性、稳定性以及易于制备的特点，被广泛应用于基因组分析、PCR产物检测、限制性酶切分析等实验中。
一、基本原理
琼脂糖是从海藻中提取的一种多糖，其形成的凝胶具有多孔结构。在电泳过程中，DNA分子由于带有负电荷，在电场作用下向正极迁移。不同大小的DNA片段在凝胶中迁移的速度不同，从而实现分离。通过染色（如溴化乙锭）可观察到DNA条带，进而判断样品中DNA的大小和含量。
二、实验步骤简要总结
| 步骤 | 内容 |
| 1 | 准备琼脂糖凝胶溶液（通常浓度为0.8%~2%） |
| 2 | 熔化琼脂糖并冷却至适当温度 |
| 3 | 倒入模具中形成凝胶，并插入梳子 |
| 4 | 待凝胶固化后，移除梳子，形成加样孔 |
| 5 | 将DNA样品与上样缓冲液混合后加入凝胶孔 |
| 6 | 将凝胶放入电泳槽中，加入电泳缓冲液 |
| 7 | 接通电源，进行电泳（通常电压为50~100V） |
| 8 | 电泳结束后，使用染色剂显影并拍照记录 |
三、影响因素
| 因素 | 影响说明 |
| 凝胶浓度 | 浓度越高，孔径越小，小片段迁移越慢 |
| 电压 | 电压过高可能导致DNA断裂或条带模糊 |
| 缓冲液 | 不同缓冲液影响电导率和pH值，影响迁移速度 |
| DNA大小 | 片段越大，迁移越慢，条带越靠后 |
| 染色剂 | 影响可见度和灵敏度，常见为EB或SYBR Green |
四、应用领域
- PCR产物分析
- 基因组DNA的完整性检测
- 限制性酶切产物分析
- RNA电泳（需用甲醛或变性条件）
- 质粒DNA纯度检测
五、优缺点比较
| 优点 | 缺点 |
| 操作简便 | 分辨率有限，不适合超大分子 |
| 成本低 | 无法区分大小相近的片段 |
| 易于观察 | 需要染色，存在毒性风险（如EB） |
| 适合常规实验 | 不能定量分析（需配合图像分析软件） |
琼脂糖凝胶电泳作为基础而实用的技术，至今仍广泛应用于分子生物学研究中。随着技术的发展，虽然出现了更高级的电泳方法（如脉冲场电泳、毛细管电泳），但琼脂糖凝胶电泳因其简单、经济、直观等特点，仍然是实验室中不可或缺的工具之一。